Новый коронавирус 2019 (Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG)), антитела IgG к S1-домену белка шипа, количественное опред., ИФА

Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG) - иммуноферментная тест-система, предназначенная для количественного определения антител класса IgG к коронавирусу SARS-CoV-2 в сыворотке и плазме (ЭДТА, гепарин, цитрат) крови человека, в т.ч. после вакцинации S1/RBD–содержащими вакцинами. Набор предназначен для использования только в лабораторных условиях, отвечающих требованиям работы с возбудителями инфекционных заболеваний 3-4 группы, квалифицированным медицинским персоналом. Диагностикум имеет "CE"-маркировку, свидетельствующую о соответствии основным профильным директивам ЕС и гармонизированным стандартам Европейского Союза, и зарегистрирован в Росздравнадзоре (РЗН 2022/17430 от 31.05.2022).

Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG) это:

• высокоспецифичное определение IgG-антител к SARS-CoV-2 в сыворотке и плазме крови с использованием S1-домена белка шипа нового коронавируса (применяется, например, в качестве антигена-мишени при производстве вакцины "Гам-КОВИД-Вак"/Спутник V), включая иммунологически значимый домен связывания рецепторов (RBD-домен), который является важным целевым антигеном для вируснейтрализующих антител;
• доступная количественная оценка защитного гуморального иммунитета с возможностью полной автоматизации анализа;
• результаты в стандартизированных единицах измерения (BAU/мл);
• отличные точностные характеристики (чувствительность 90-93%, специфичность 99,8%) набора и хорошая корреляция с различными тест-системами для обнаружения нейтрализующих антител, подтвержденные внешними независимыми исследованиями.

Показания к применению тест-системы: 

• диагностика COVID-19 (в дополнение к методам прямого обнаружения патогена; подтверждение факта заражения коронавирусом SARS-CoV-2 (в дополнение к методам прямого обнаружения патогена);
• оценка выраженности и динамики поствакцинального иммунитета после вакцинации S1/RBD-содержащими вакцинами;
• определение коллективного/популяционного иммунитета в эпидемиологических исследованиях 

Высокая корреляция результатов, полученных с помощью Anti‐SARS‐CoV‐2 QuantiVac ELISA (IgG), с тестами нейтрализации вируса после COVID-19 – гарантия доступного получения количественной оценки состояния защитного гуморального иммунитета к COVID-19.

Preprint: Rubio‐Acero et al. (2021) "In search for the SARS‐CoV‐2 protection correlate: A head‐to-head comparison of two quantitative S1 assays in a group of pre‐characterized oligo‐/asymptomatic patients” doi: https://doi.org/10.1101/2021.02.19.21252080

С целью оценки возможности использования тест-системы Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG)) для оценки защитного гуморального иммунитета после перенесенного заболевания COVID-19 было проведено исследование по сравнительному изучению результатов, полученных при использовании данной тест-системы, в сравнении с контрольными тестами нейтрализации вируса SARS-CoV-2. В исследовании были использованы 362 образца плазмы, полученные от 108 пациентов с ПЦР-подтвержденным диагнозом COVID-19, 111 пациентов, не болевших и не имевших антител к SARS-CoV-2 (отрицательный контроль), и 143 пациентов с антителами к SARS-CoV-2, но отрицательным результатом ПЦР. роведено сравнение результатов, полученных при использовании Anti‐SARS‐CoV‐2 QuantiVac ELISA (IgG), со следующими контрольными тестами:

1. тест прямой микронейтрализации дикого типа вируса SARS-CoV-2 (штамм MUC-IMB-01, изолированный в январе 2020 года) – для оценки нейтрализующей способности антител (NT); оценивалась степень разведения - образцы с разведением менее 1:5 считались отрицательными, ≥ 1:5 считались положительными;
2. тест имитации нейтрализации вируса GenScript cPass (GS-cPass) – для оценки подавляющей способности антител; оценивался % ингибирования от 30% до 100%, пороговое значение, установленное производителем, - 20%.

При оценке результатов Anti‐SARS‐CoV‐2 QuantiVac ELISA (IgG) использовалось два пороговых значения – значения ниже 25,6 BAU/мл считались отрицательными, выше 35,2 BAU/мл – положительными, значения между этими величинами считались неопределенными. При оценке полученных результатов было показано, что корреляция результатов Anti‐SARS‐CoV‐2 QuantiVac ELISA (IgG) с GenScript cPass составила 93% для истинно-положительных и 97% для истинно-отрицательных результатов. При концентрации выявленных методом ИФА нейтрализующих антител ≥ 49.8 Ед/мл (или BAU/мл) положительная реакция в тесте микронейтрализации вируса в разведении >1:5 наблюдалась в 95% случаев.

Euroimmun Anti‐SARS‐CoV‐2 QuantiVac ELISA (IgG) (95% ДИ)
GS-cPass ≥ 20	≥ 27,49* (23,94-31,57)
GS-cPass ≥ 30	≥ 40,62 (36,00-45,83)
NT ≥ 1:5	≥ 49,78 (43,42-57,06)
NT ≥ 1:10	≥ 104,06 (91,34-118,54)

* значение ниже порога позитивных значений Высокая корреляция с тестом прямой микронейтрализации вируса и тестом имитации нейтрализации вируса свидетельствует, что Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG) может рассматриваться в качестве альтернативы трудоемким тестам прямой нейтрализации вируса, для оценки выраженности гуморального иммунитета в отношении инфекции SARS‐CoV‐2. Использование количественных тест-систем, имеющих высокую корреляцию с тестами нейтрализации, позволит оценивать и сравнивать защитный гуморальный ответ у пациентов, перенесших заболевание разной степени тяжести и в бессимптомной форме, а также поствакцинальный иммунитет. Количественное определение антител имеет важное значение при решении вопроса о возможности использования донорской плазмы – в зависимости от содержания нейтрализующих антител.

Использование Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG) для оценки выраженности поствакцинального иммунного ответа в зависимости от возраста

Preprint: Müller et al. (2021) "Age‐dependent immune response to the Biontech/Pfizer BNT162b2 СOVID‐19 vaccination" doi:  https://doi.org/10.1101/2021.03.03.21251066

Для оценки выраженности потсвакцинального иммунитета к SARS-CoV-2 в зависимости от возраста проведено исследование с участием 176 добровольцев после вакцинации**, среди которых 93 человека были моложе 60 лет, 83 человека – старше 80 лет. Определение уровня антител проводилось через 17-19 дней после 1-го введения вакцины и через 17 дней после 2-го введения с использованием ИФА-набора Euroimmun Anti-SARS-CoV-2-QuantiVac-ELISA (IgG) на антитела к S1-домену и теста нейтрализации (инфекционный штамм EPI_ISL_425126, при уровне биологической безопасности BSL-3). При оценке результатов Anti‐SARS‐CoV‐2 QuantiVac ELISA (IgG) использовалось два пороговых значения – значения ниже 25,6 Ед/мл считались отрицательными, выше 35,2 Ед/мл – положительными, значения между этими величинами считались неопределенными.

После 1-й вакцинации у участников:

• моложе 60 лет титр IgG составлял 0 ‐ 3840.0 BAU/мл (в среднем, 313.3 BAU/мл), 4.4 % значений были ниже порогового значения, 2.3% неопределимы;
• старше 80 лет титр IgG составлял 0 ‐ 484.7 BAU/мл (в среднем, 41.2 BAU/мл), 65.9% значений были ниже порогового значения (> 35.6), 9.4% неопределимы.

После 2-й вакцинации у участников:

• моложе 60 лет титр IgG составлял 81.6 ‐ 32000.0 BAU/мл (повышение среднего значения ~10 раз до 3702.0 BAU/мл), отсутствие значений ниже пороговых;
• старше 80 лет титр IgG составлял 0 ‐ 16891.0 BAU/мл (в среднем, 1332.0 BAU/мл), 10,6% значений ниже порогового значения.

При оценке нейтрализующей способности было установлено:

• после 1-й вакцинации достаточно высокий титр нейтрализующих антител (от 1:10 до 1:2560) имелся у 16.1% участников моложе 60 лет и только у 1.2% участников старше 80 лет;
• после 2-й вакцинации у 97.8% участников моложе 60 лет и у 68.7% участников старше 80 лет титр нейтрализующих антител составлял от 1:10 to 1:320.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о менее выраженном иммунном ответе при вакцинации у лиц старше 80 лет. По мнению авторов, менее выраженное образование защитных антител может требовать более раннего проведения ревакцинации для обеспечения более надежной защиты от инфекции.

** вакцина Pfizer и BioNTech от COVID-19 (BNT162b2)