Лютеинизирующий гормон, ИФА (HUMAN, Германия)

Назначение

Лютеинизирующий гормон (ЛГ) представляет собой гликопротеин с молекулярным весом около 30000 дальтон, который синтезируется передней долей гипофиза. ЛГ стимулирует овуляцию и активизирует синтез тестостерона в клетках Лейдига в мужских гонадах. Во время первой фазы менструального цикла ЛГ стимулирует развитие Граафовых пузырьков. Овуляция происходит после достижения максимальной концентрации ЛГ. Было доказано клиническое и диагностическое значение измерения уровня ЛГ для оценки функциональной активности оси гипоталамус-гипофиз-гонады, регулирующей репродуктивную систему организма. Определение ЛГ необходимо для мониторинга лиц, которым осуществляют in vitro оплодотворение.

Принцип метода

ЛГ иммуноферментный тест фирмы HUMAN основан на классическом «сэндвич» методе ИФА 2-го поколения. В нем используется высокоаффинная система биотин-стрептавидин. На лунках микропланшета адсорбирован стрептавидин. При первой инкубации образцы сыворотки, калибраторы или контроли, конъюгат (меченые пероксидазой антитела козы против ЛГ), а также биотинилированные моноклональные антитела к ЛГ смешиваются друг с другом, образуя при этом структуру типа «сэндвич», связанную с поверхностью лунок за счет взаимодействия биотина с иммобилизованным стрептавидином. После инкубации не связавшийся конъюгат и моноклональные антитела удаляются промывкой. Добавление в лунки субстрата (2 стадия) приводит к образованию окрашенного продукта, который меняет цвет на желтый при добавлении стоп-реагента, вносимого для остановки реакции. Интенсивность окраски измеряется фотометрически и пропорциональна концентрации ЛГ в пробе. Измерение оптической плотности калибраторов и образцов проводят на планшетном фотометре (например, HUMAREADER или ELISYS, Human). Численное значение концентрации определяется с помощью калибровочной кривой, построенной по калибраторам, входящим в состав набора.