RIDA AllergyScreen Панель 3, иммуноблот (R-Biopharm, Германия)

Введение

Назначение иммунной системы состоит в защите организма от патогенных бактерий, вирусов и других микроорганизмов. Защитная реакция необходима для обеспечения обороны организма при начальном контакте с патогенами, а также для его иммунизации – при повторном контакте. Всем аллергическим реакциям предшествует бессимптомная фаза первоначального контакта, во время которой образуются специфические иммуноглобулины класса Е (IgE-антитела). При повторном контакте с аллергенами, запускающими реакцию, эти IgE-антитела реагируют с аллергенами и приводят к высвобождению медиаторов (из тучных клеток или мастоцитов), таких как гистамин, лейкотриены, простагландины и т.д., которые приводят к развитию симптомов аллергии. Когда имеется аллергическая реакция, аллергены, вызвавшие ее, могут быть установлены определением специфических IgE-антител в сыворотке крови. Данный метод может использоваться также для выявления сенситизации организма, не сопровождающейся видимыми симптомами.

Принцип теста

Тест RIDA® AllergyScreen (панели 1, 2, 3, 4) основан на принципе иммуноблотинга. Специфические аллергены, соответствующие составу панели, нанесены на поверхность нитроцеллюлозных мембран-стрипов. IgE-антитела, специфичные к этим аллергенам, присутствующие в образцах пациентов, реагируют с антигенами, обеспечивая тем самым на второй стадии инкубации прикрепление антител к IgE человека, конъюгированных с биотином (проявляющие антитела), к полосам аллергенов на стрипах. Во время третьей стадии инкубации к биотину прикрепляется стрептавидин, конъюгированный с щелочной фосфатазой (конъюгат). Фермент превращает бесцветный субстрат (BCIP / NBT) в конечный продукт реакции сине-сиреневого цвета. Интенсивность синего окрашивания прямо пропорциональна количеству аллерген-специфических антител в сыворотке. Оценка результата производится визуально по специальному шаблону, который прилагается к набору тест-панелей.