Введение и принцип метода
До проведения иммуноферментного анализа проводится количественное ацилирование метанефрина (ме- тадреналина) и норметанефрина (норметадреналина). Набор 2-MET Urine ELISAFast Track основан на твердофазном конкурентном варианте иммуноферментного анализа. На поверхности лунок планшета (твердой фазе) иммобилизованы молекулы антигена. Молекулы ацилированного метанефрина или норметанефрина, содержащиеся в стандартах, контролях и исследуе- мых образцах, и молекулы, иммобилизованные на твердой фазе, конкурируют за ограниченное число цен- тров связывания специфичных антител. После того, как реакция связывания достигнет равновесия, несвя- завшиеся с твердой фазой антигены и комплексы «антиген-антитело» удаляются промывкой. Антитела, связавшиеся с иммобилизованным на твердой фазе антигеном, выявляются с помощью конъюгата — анти- тел к IgG кролика, меченных пероксидазой. В качестве субстрата используется тетраметилбензидин (ТМБ). Интенсивность цветовой реакции измеряют при длине волны 450 нм. Количественное содержание метанефрина или норметанефрина в исследуемых образцах рассчитывается по калибровочной кривой, построенной по известным концентрациям в стандартах.
