Боррелиоз собак (IgG), иммуноблот (Euroimmun, Германия)

Набор обеспечивает качественное определение in vitro иммуноглобулинов собаки класса IgG к антигенам боррелий в сыворотке и плазме крови, для выявления инфекции, вызванной Borrelia. В качестве подтверждающего теста, набор Боррелиоз собак (IgG), иммуноблот обеспечивает надежную и чувствительную дифференциацию между реакциями, специфическими для боррелий, и неспецифическими реакциями, за счет использования определенных антигенов, нанесенных в виде отдельных полос. Кроме того, тест позволяет дифференцировать антитела, продуцируемые в ответ на вакцинацию, от антител, продуцируемых в ответ на инфекционный процесс.

Боррелиоз у собак

Как и люди, собаки заражаются боррелиозом от укусов клещей, причем вероятность заражения животных существенно выше. Как правило, инфекционный процесс длительное время протекает бессимптомно. Некоторые симптомы, характерные для заболевших людей, - например, мигрирующая эритема - у собак не возникают. Поэтому первым характерным симптомом заболевания у животных обычно бывает хромота, возникающая вследствие артрита или миозита спустя недели и месяцы после заражения. Несвоевременное выявление заболевания может привести к снижению мышечного тонуса, неврологическим проявлениям, прогрессирующим мышечным болям, поражению почек и нарушению сердечной деятельности. 

Инфекционный процесс сопровождается образованием специфических антител, что является основой для серологической диагностики боррелиоза собак. Как и для большинства инфекционных заболеваний человека, рекомендуется двухэтапная схема исследования, включающая высокочувствительный скрининговый и высокоспецифичный подтверждающий тесты. Серологическая диагностика включает определение антител классов IgG и IgM. Антитела IgG к боррелиям могут быть выявлены приблизительно от 4 до 6 недель после инфицирования. Рост титра антител варьируется в зависимости от антигена боррелий. Антитела к VlsE могут быть обнаружены относительно рано и их титр снижается после нескольких недель. Однако, другие антитела, например, к p100, достигают пика позже и сохраняться в течение некоторого времени (месяцы или годы)

VlsE (вариабельная основная белковоподобная последовательность, экспрессированная, varible major protein-like sequence, expressed) является одним из наиболее диагностически важных антигенов. Это поверхностный липопротеин, который экспрессируется только in vivo и не содержится в вакцинах. Зараженные собаки показывают ранний и сильный IgG ответ на VlsE. Благодаря вакцинации от боррелиоза, антиген OspA имеет особое значение для диагностики боррелий у собак. OspA является наиболее важным поверхностным белком боррелий, как в клещах, так и в культуре (производство вакцин). Антитела к OspA продуцируются в основном после вакцинации. Инфекции крайне редко приводят к появлению титров антител к OspA, потому что, после контакта патогена с кровью, у инфицированного животного наблюдается переход в продукции антител к OspC, как наиболее важному поверхностному белку.

Таким образом, может быть проведена дифференциальная диагностика вакцинации или инфицирования как при параллельном, так и при индивидуальном определении антител к VlsE и OspA. 

Специфичность и чувствительность Образцы сывороток собак, инфицированных Borrelia burgdorferi, показывали пограничный или положительный результат (контакт с патогеном или инфекция) в течение 7 недель после инфицирования, при использовании набора Боррелиоз собак (IgG), иммуноблот чувствительность составила 100%. Образцы сывороток собак, которые были вакцинированы от боррелиоза, показывали очень четкую полосу антигена OspA, при этом полоса по антигену VlsE всегда оставалась негативной. Обратная картина проявления полос наблюдалась у инфицированных собак, таким образом, можно проводить дифференциальную диагностику между инфицированием и вакцинацией. При исследовании контрольной панели сывороток собак, которые никогда не контактировали с клещами (лабораторные собаки), но были регулярно вакцинированы от лептоспироза, набор Боррелиоз собак (IgG), иммуноблот показал специфичность 100%.

Принцип метода Тест Боррелиоз собак (IgG), иммуноблотоснован на методе лайнблота. Набор содержит тестовые стрипы, покрытые параллельными полосами высокоочищенных антигенов, разделенных гель-электрофорезом. Тестовые стрипы инкубируют на первой стадии реакции с образцом разведенной сыворотки или плазмы пациента. В случае, если образец положительный, специфические антитела класса IgG (а также классов IgM и IgA) будут связываться с соответствующими антигенными полосами. Для обнаружения связанных антител проводится вторая инкубация с использованием ферментного конъюгата (антитела к IgG собаки, меченные щелочной фосфатазой), который способен вызывать развитие цветной реакции. Подробная инструкция предоставляется по запросу.  

Исследуемые образцы: сыворотка или плазма крови собак.