Аутоантитела к инсулину // Insulin auto-Ab (Biomerica, США)

Назначение

Isletest-IAA представляет собой иммуноферментный тест для качественного определения циркулирующих аутоантител класса IgG к человеческому инсулину (Insulin Autoantibodies, IAA) в сыворотке крови человека. Совместно с клиническими данными и результатами других лабораторных тестов может быть использован для диагностики инсулинозависимого диабета.

Введение

Инсулинозависимый диабет (ИЗД), или диабет первого типа, представляет собой аутоиммунное заболевание, при котором инсулиновая недостаточность является следствием иммунологической деструкции β-клеток поджелудочной железы. У лиц, генетически предрасположенных к ИЗД, иммунологическая атака на β-клетки имеет место во время асимптоматического периода, получившего название "Преддиабетическая фаза". Эта фаза начинается обычно за несколько лет до появления клинических симптомов заболевания. В течение этого времени в крови многих пациентов определяются антитела к клеткам островков Лангерганса и/или инсулину. Аутоантитела к инсулину были впервые описаны Hirata и др. в 1970 году у пациента со спонтанной гипогликемией. Проведенные исследования выявили, что IAA относятся к классу IgG и идентичны антителам, выявляемым у больных ИЗД, получающих инсулин. Роль IAA в патогенезе ИЗД была впервые показана Palmer и др., которые обнаружили IAA у 18% больных с впервые выявленным ИЗД. Использование в исследованиях высокочувствительного радиоиммунологическом анализа позволило выявить IAA примерно у 40% больных с впервые выявленным и не леченным ИЗД. По данным других авторов частота IAA у больных с впервые выявленным диабетом составляет от 20 до 50%. Обследование гетерогенной группы пациентов с высоким риском развития ИЗД (лица без признаков ИЗД, имеющие наследственную предрасположенность, включая дискордантных монозиготных близнецов и ICA-позитивных родственников первой степени родства больных ИЗД) выявило аутоантитела к инсулину у 31% лиц, имеющих антитела к клеткам островков Лангерганса. Показано, что одновременное присутствие аутоантител к клеткам островков Лангерганса и инсулину значительно повышает вероятность развития ИЗД. В других исследованиях IAA были найдены у 40% ICA-позитивных и 16% ICA-негативных пациентов первой степени родства с больными ИЗД. Более того IAA были найдены у 4 пациентов, у которых в дальнейшем развился ИЗД. Конкретные механизмы участия IAA в патогенезе ИЗД до конца не изучены. Наиболее чувствительный метод определения аутоантител к инсулину основывается на конкурентном радиоиммунологическом анализе. Isletest-IAA - метод определения IAA на основе твердофазного иммуноферментного анализа. Метод прост в исполнении и не требует использования радиоактивной материалов.

Принцип метода

Тест основан на принципе твердофазного непрямого иммуноферментного анализа. Человеческий инсулин адсорбирован в лунках стандартного микропланшета. При внесении контролей и разведенных исследуемых сывороток в лунки присутствующие в них антитела связываются с иммобилизованным инсулином. Несвязавшиеся антитела удаляются промывкой. После этого в лунки вносятся антитела к IgG человека, меченые ферментом (конъюгат), которые связываются с комплексом «антиген-антитело», иммобилизованным на поверхности лунок. Несвязавшийся конъюгат удаляется промывкой. Добавление субстрата приводит к развитию окраски, интенсивность которой прямо пропорциональна концентрации антител к инсулину и может быть измерена фотометрически. Полученные результаты оцениваются путем сравнения с точкой отсечения (cut-off).